激光共聚焦显微镜在生物学上的应用
1.适用于细胞生物学、细胞生理学、神经生物学和神经生理学等几乎所有涉及细胞研究领域。
2.对活细胞进行无损伤性的实时观察分析,进行形态和功能相结合的研究。对细胞检测无损伤、、可靠和优良重复性;数据图象可及时输出或长期储存。
3.对活细胞和组织或细胞组织切片进行连续断层扫描,能获得精细的单个细胞或一群细胞或所观察的局部组织的各个层面结构(二维和三维)(包括细胞特异结构-如细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统,样品的深层结构)和完整的三维图像(如分析随时间变化,即四维图象,也可进行随荧光波长变化的图象,即可达到更多维的图象)。定位组织细胞及其他所需要观察的对象结构的空间位置,进行实时动态的观察、分析和记录;分析的定性、定量、定时和定位分布。
4.荧光标记探针标记的活细胞或切片标本的细胞生物物质,膜标记、细胞示踪、免疫物质、免疫反应、受体或配体,核酸等观察;可以在同一张样品上进行同时多重物质标记,同时观察。
5.细胞内离子荧光标记,单标记或多重标记,检测细胞内如pH和钠、钾、钙、镁等离子浓度的比率测定及其动态变化;
6.细胞膜电位测量,自由基的检测等;
7.进行定位的荧光漂白恢复实验,结合荧光漂白中荧光丢失实验,研究细胞间通讯和其他有关细胞内物质(分子等)的运动;在时间扫描实验和光漂白(光淬灭)实验中,可同时对每个通道的数据和图象进行同时输出和转换。进行荧光共振能量转移实验,通过荧光波长的变化,研究细胞内分子、离子的运动,相互作用。
8.有非常(空间定位、定量、定波长、定时间)、灵敏、快速和能在同一时间内完成对细胞组织多重荧光标记(即使是发射波长非常接近,比如相差只有数nm的多重荧光)的各种波长图象的分离和观察分析,以及多重荧光标记共定位等的在线测量分析功能
激光共聚焦显微镜在生物领域的*性
与传统光学显微镜相比, 激光共聚焦显微镜 具有更高的分辨率,实现多重荧光的同时可观察并可形成清晰的三维图像等优点,在对生物样品的观察中, 激光共聚焦显微镜 有如下*性:
1、对活细胞组织或细胞切片进行连续扫描,可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。
2、可以得到比普通荧光显微镜更高对比度、高解析度图像,同时具有高灵敏度,杰出样品的保护。
3、多维图像的获得。如7维图像(XYZaλIt):xyt 、xzt 和xt扫描,时间序列扫描、旋转扫描、区域扫描、光谱扫描,同时方便进行图像处理。
4、细胞内离子荧光标记。单标记或多标记,检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。
5、荧光标记。探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质,膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体、核酸等观察;可以在同一张样品上同时进行多重物质标记,同时观察。
6、对细胞检测无损伤、、可靠和优良重复性;数据图像可及时输出或长期储存。