高内涵筛选(high content screening, HCS)技术,指在保持细胞结构和功能完整性的前提下检测被筛样品,分析其对细胞形态、生长、分化、迁移、凋亡、代谢途径及信号转导等各个环节的影响,在单一实验中获取大量与基因、蛋白及其他细胞成分相关的信息,从而实现对化合物多靶点、多参数的同时检测,确定其生物活性和潜在毒性的过程。这种量化的方法适用于大规模药物筛选、药理毒理实验等等。以往在获取细胞图像时,由于被测样品量大,而显微镜检测视野小、操作繁琐,检测一张96孔板需要几个小时的时间,难以满足实验需求。今天我们以24孔板为例为大家演示如何利用THUNDER实现高内涵快速扫描成像。
首先设定好红绿双色通道和曝光时间,选择适合高内涵快速成像的ICC THUNDER方法,然后进入LAS X Navigator导航式界面。
然后点击carrier,去选择对应孔板的模具,那这边我们选择24孔板即可出现对应画面。
那比如我们想在每个孔中做随机10个点的多点扫描,点击ok可出现10个位置固定的模式。
那如果想要10个点的位置不一样,我们可以勾选random,这样10个点的位置是随机的。
此外,我们还可以调整点的分布,让其更靠近中心或边缘。比如,更靠中心一些,ok,那这样可以看到10个点更聚集在孔的中央。
或者,我们还可以进行拼图,比如,做一个5X5的拼图,这样可以看到每个孔中有一个5X5视野的拼图。
或者可以以孔的覆盖度来进行拼图。比如我们选择60%的覆盖度,可以看到是这个样子。
这里以5X5拼图为例,可以看到右下角24个孔拍完总共需要的时间和数据大小。
设置完成后,点击start进行拍摄。拍摄完成之后,可通过鼠标滚轮对每个孔的拼图进行放大查看,也可以对任意一个孔的图像进行查看。图像清晰、无拼接痕迹。
以上多孔板高内涵快速成像的操作就完成了。
在操作视频里,我们可见THUNDER可随心所欲地控制多孔板高内涵快速成像;直观又准确无误的操作让您用非常少的投入便实现从图像采集到创建报告;从此,您无需在学习软件操作上花费大量的精力,将更多的时间投入到研究中!
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