MicaCam是生命科学研究人员聚在一起互动和探讨生命科学的地方。分享您的问题并参与直播。
欢迎您和您的生命科学研究团队加入我们,一起观看MICA如何从源头简化您的工作流程。
第2集MicaCam的内容是结合宽场和共聚焦成像来研究斑马鱼胚胎(Danio rerio)的早期发育阶段,即从卵细胞到多细胞阶段。
学习要点
· 如何创建一个样品的大图预览,然后选择方向和表达水平正确的胚胎进行进一步成像
· 如何利用MICA的环境控制功能,在稳定的条件下进行延时拍摄
· 如何在一场实验中结合使用温和的宽场成像和高分辨率的共聚焦成像
演讲人
Oliver Schlicker博士
Oliver Schlicker博士,高级应用经理——徕卡显微系统
Oliver拥有德国海德堡大学的神经细胞生物学博士学辞掉德国斯图加特IZI的Imaging Facility的管理工作后,他于2008年加入徕卡显微系统韦茨拉尔公司,担任应用经理,负责研究荧光宽场显微镜。
Camilla Autorino博士生
Camilla Autorino,博士生——Petridou研究组,EMBL海德堡
Camilla研究斑马鱼的早期胚胎发育阶段,关注于组织和细胞层面。她来自意大利,在罗马的'La Sapienza'大学获得了生物学学士学位,然后她来到了德国,在海德堡大学攻读发育和干细胞生物学的硕士学位。
观看实验
MicaCam第02集——原定播出日期:2022年4月6日
我们的嘉宾Camilla Autorino向我们介绍了她的工作:研究斑马鱼的早期发育阶段。更具体地说,她的工作重点是分析张力等组织属性的变化会对胚胎的整体发育产生哪些影响。在这一集的MicaCam中,她展示了一个应用工作流程:从胚胎样品的大视野预览到选择表达水平正确的胚胎,先在宽场下进行活细胞成像,然后在高分辨率下进行共聚焦成像。
该应用展现了MICA环境控制的稳定性,以及如何在单一培养皿中培养数个处于不同发育阶段的胚胎。斑马鱼胚胎的温度必须稳定在28°C;如果温度升高或降低,它们的培养速度将加快或减缓,呈现出不同的动态变化。因此,稳定控制温度和湿度对这类应用很重要。
此外,由于在两个荧光标记同时表达的情况下,胚胎的识别度将大大提高,因此选择方向和表达水平优异的胚胎,以供后期成像的步骤将变得更加轻松。我们的嘉宾还展示了用MICA从宽场成像切换到共聚焦成像的便捷体验,与传统显微镜相比,她无需过多操作,即可利用自动成像功能获得所有必要的数据集。
图1:图片说明:发育中的斑马鱼(Danio rerio)胚胎从球体阶段到体节期的延时短片。图像中的鱼系是一个中胚层命运报告的转基因鱼系(Tbxta:GFP),在绿色通道中可见。细胞间的液体(或细胞间的空间)用Dextran与Alexa 647耦合标记,在红色通道中可见。由德国海德堡EMBL Petridou研究组的Camilla Autorino提供。
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