您好!欢迎访问徕卡显微系统(上海)贸易有限公司网站!
全国服务咨询热线:

4006307761

当前位置:首页 > 技术文章 > 冷冻切片机的使用方式以及注意事项

冷冻切片机的使用方式以及注意事项

发布时间:2022-11-09      点击次数:213
  组织切片技术是医学和生命科学领域中的重要技术,主要有石蜡切片、震动切片和冰冻切片等技术。其中冰冻切片技术的应用越来越广泛,其优点就是快速、便捷,且能较完整的保存抗原活性,如细胞的某些抗原成分,特别细胞膜抗原,受体抗原,酶及肽类抗原在石蜡切片的处理过程中,不可避免的受到破坏或失去抗原活性,而且对于原位分子杂交等核酸探针杂交实验,冰冻切片技术也成为切片技术。
  仪器的操作系统主要由总开关、操纵面板1、操纵面板2、手轮和冷冻箱组成。总开关控制仪器的供电,仪器开机运行后,无特殊原因不要关闭总开关,若由于断电或其他原因关闭总电源后,则必须要对冷冻箱及其附件进行除菌和干燥处理后才能重新启动仪器。
  2 操纵面板1主要控制冷冻箱照明、温度、除霜、时间设定等功能,并显示切片厚度、切片模式等信息。
  温度调节包括箱体温度(CT)和样品头温度(OT),OT温度设定可比CT略高。不同的组织选用不同的温度进行切片,过高或过低的温度均会影响切片的质量,表1中是一些常用组织的参考切片温度,具体采用的温度还需操作者在实践中进行摸索。除霜是冰冻切片机每天均需进行的操作,用于除去仪器运行过程中,箱体内部产生的霜。LeicaCM3050S具有三种除霜模式:箱体自动除霜、箱体手动除霜和样品头手动除霜模式。箱体自动除霜每24小时自动进行一次,具体时间可以人为设定(最好设定在00:00左右),除霜结束后仪器自动降温到设定值。自动除霜时程的默认设置是8分钟,如果仪器长时间使用后,除霜8分钟无法使箱体解冻,可以通过增加除霜时程来解决。箱体手动除霜和样品头手动除霜模式可以通过选择手动除霜键来进行(一般不使用)。
  3 操纵面板2主要控制电动切片、样品头升降、切片厚度和修片厚度。电动切片有三种模式:间歇模式、连续模式和单次模式。电动切片速度可以手动调节,电动切片的开启和中断可以手控或者通过脚踏板控制。样品头升降主要用来调节样品和刀片之间的距离,具有粗调和细调两种模式。
  4 仪器使用后的操作。日常使用后需进行一些处理:将OT设为0℃,CT设为-10℃,这样既可以延长压缩机的寿命又利于除霜过程的进行;取出刀片并进行除菌、干燥以备下次使用;清除箱体中的切片废弃物;取出未使用的组织样本另行保存;锁定手轮和控制面板1。长时间不使用仪器可以将总开关关闭,但箱体和所有有关切片的附件均需进行除菌和干燥处理。
  5 包埋剂的使用。包埋剂主要用于将组织与样品台固定在一起,并包被组织以利于展片。包埋剂可选用常见的生理盐水或PBS等缓冲液,近年来一种混合型包埋剂OCT,使用的越来越广泛,OCT包埋后,组织切片更加平整。OCT是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,可以直接用于组织包被,也可以对组织进行切片预处理后再切片。预处理方法:组织浸蔗糖后放入蔗糖与OCT 1:1体积比的混合液中,室温2小时;放入OCT中室温4小时(具体时间视组织大小而定)。
  冰冻切片机使用注意事项
  1、开机后速冻台温度非常低,请小心操作勿徒手接触。
  2、固定样品时应将样品置于包埋盒底部,避免在进行切片时先要进行长时间的修片损坏磨损切片刀。
  3、使用刷子扫除多余组织碎片时,请不要刷刀片顶部的刀刃,同时由下到上顺着刀面轻刷。
  4、切片过程中请将冷冻箱窗口留个小缝即可,不可大敞着口进行切片。
  5、切片完毕后务必将刀片护刀架放好,将手轮锁死在12点位置。
  6、如果切完样品还有下一位同学需要用的话,可将机器的速冻台和冷冻箱温度调至-8℃,然后按锁定键,机器即进入待机状态。
  7、每次使用完毕一定要将切片机冷冻箱内清理干净,保持切片机的整洁。同时填写《仪器使用记录》,包括“使用日期、实际使用时间、使用者、机器状态”。
  8、如若要对带有生物危害性的样品进行切片前,请提前与仪器负责人再进行切片。
徕卡显微系统(上海)贸易有限公司
地址:上海市长宁区福泉北路518号2座5楼
邮箱:lmscn.customers@leica-microsystems.com
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息