电镜样品冷冻固定技术怎么选？一文理清两大核心技术

冷冻固定技术决定了电镜图像的真实性和分辨率

在电子显微镜研究中，样品冷冻固定技术是决定成像质量的关键环节。如何在瞬间“定格"生物样品的原始状态，避免冰晶损伤和化学假象？两大核心技术各展所长，本文将为您理清思路。

高压冷冻技术（HPF）：厚样品的黄金标准

原理：

利用2100 bar高压降低水的冰点，配合液氮喷射实现12,000°C/s以上的极速降温，使样品中的水形成非晶态冰而非破坏性冰晶。

优点：

✦可处理200μm厚度的样品（如动植物组织、细胞团）

✦保存细胞器膜结构完整，接近生理状态

✦毫秒级捕捉动态过程（需配合光/电刺激模块）

局限：

✦设备复杂度高，需专用仪器

✦液氮消耗量大（Leica EM ICE约30升/天，比同类型产品型号节省70%以上的液氮）

适用样品：

动物组织、植物组织、三维细胞培养物、细菌、病毒等

投入冷冻技术（Plunge Freezing）：薄样品的效率之选

原理：

将样品载网直接投入-196°C液态乙烷/丙烷，实现超高速冷冻。

优点：

✦操作简便快速

✦成本低，无需复杂设备

✦保存表面纳米结构

局限：

✦仅能处理＜10 μm超薄层样品

✦厚样品内部易形成冰晶

适用样品：

病毒颗粒、蛋白质溶液、脂质体、单层细胞

徕卡显微系统：全流程冷冻解决方案

针对不同研究需求，徕卡显微系统提供专业级电镜冷冻制样设备：

Leica EM ICE高压冷冻仪

整合光/电刺激模块/活细胞和冷冻光电关联/冷冻断裂蚀刻，5种波长LED实现毫秒级动态捕捉，支持连续处理9个样品，日耗液氮仅30升，是神经突触传递等细胞和组织研究的利器。

应用案例： Dinoflagellate_plankton

Leica EM GP2投入冷冻仪

自动吸除多余液体，温湿度可控环境箱（4-60°C，湿度99%），实现薄液层样品的一键式玻璃化冷冻，操作效率提升50%。

特别的单面滤纸吸附设计，可有效保护样品不被挤压，尤其是外泌体、单层细胞等易被挤压形变的样品。

Leica EM GP2

单面滤纸吸附

应用案例：细菌/蛋白/囊泡/微管

Leica EM AFS2冷冻替代仪

专为HPF样品设计，程序化温控替代流程（如-90°C维持72小时，连续可控梯度升温），搭配自动试剂处理系统，消除冰晶重结晶风险。

Leica EM AFS2

电镜的世界里，

没有“差不多"的影像，

只有“恰到好处"的技术选择

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