激光显微切割精准捕获目标细胞（MPO⁺中性粒细胞）——SERPINB3 阳性中性粒细胞在缺血性卒中血栓硬化中的致病作用

发表时间：2026 年 3 月 3 日

DOI：10.1182/blood.2025029516

文章发表于血液学顶刊《Blood》，研究缺血性卒中免疫血栓机制，为卒中精准治疗开辟新方向，有望推动新一代抗血栓、溶栓药物的研发。该文章研究中采用LMD (Laser Microdissection, 激光显微切割) 的技术手段，用于精准分离血栓中的中性粒细胞，开展空间蛋白质组学分析，保留细胞原位空间信息、实现高纯度目标细胞捕获，为发现关键分子 SERPINB3 提供技术基础。

临床转化价值

1、新型预后生物标志物：SERPINB3 可作为血栓微环境标志物，精准预测卒中患者溶栓效果与长期预后American Society of Hematology。

2、全新治疗靶点：靶向抑制 SERPINB3 可软化血栓、增强溶栓敏感性、延长有效治疗时间窗，为克服溶栓抵抗、挽救缺血半暗带提供全新策略。

3、方法学创新：建立血栓三维成像 + 空间蛋白质组学技术平台，为血栓微环境研究提供标准化方法。

该研究揭示SERPINB3 阳性中性粒细胞是驱动急性缺血性卒中（AIS）血栓进行性硬化、导致溶栓抵抗与预后不良的关键致病细胞。34 例急性缺血性卒中患者取栓血栓进行三维成像、多重染色与激光显微切割蛋白质组学分析American Society of Hematology。确认中性粒细胞是血栓中最主要的免疫细胞群体，其浸润密度与血栓硬度、胶原含量呈正相关，且与患者 90 天不良预后（mRS 2-6 分）显著关联。蛋白质组学筛选出SERPINB3（丝氨酸蛋白酶抑制剂 B3） 为预后不良组血栓中性粒细胞中上调的蛋白，其表达水平可独立预测不良预后（AUC=0.806）。

机制：中性粒细胞分泌的 SERPINB3 通过激活TGFβ1-SERPINB3-NETs-COL1A1信号轴，促进胶原（COL1A1）大量沉积与中性粒细胞胞外陷阱（NETs）形成，使血栓结构更致密、硬度显著增加American Society of Hematology。血栓硬化后会抵抗 rt-PA 等溶栓药物的降解，导致血管再通困难、缺血半暗带无法及时挽救，加重脑损伤。

作者与团队介绍

1、逯丹（Dan Lu）暨南大学附属第一医院，卒中与血栓领域青年研究者，本研究核心负责人，聚焦缺血性卒中免疫血栓机制与转化研究。

2、徐安定（Anding Xu）暨南大学附属第一医院，著名脑血管病专家，教授、主任医师，暨南大学附属第一医院原院长，长期从事缺血性卒中基础与临床研究，为团队学术带头人。

3、麦鸿成（Hongcheng Mai）中山大学孙逸仙纪念医院血栓与蛋白质组学专家，参与本研究机制与蛋白质组学核心分析。

LMD 在文中的具体应用与作用

01. 精准捕获目标细胞（MPO⁺中性粒细胞）

• 结合免疫荧光染色（标记MPO，中性粒细胞特异性标志物），在组织切片上可视化定位血栓内的中性粒细胞。

• 用激光显微切割精确切取、分离单个或一群 MPO 阳性中性粒细胞，排除红细胞、血小板、纤维蛋白等杂质，获得高纯度中性粒细胞样本。

02. 保留空间位置信息（关键优势）

• 传统 “匀浆" 蛋白质组会破坏组织空间结构，混合所有细胞成分。

• LMD 能原位分离特定区域、特定类型的细胞，确保后续分析结果严格对应血栓内中性粒细胞的真实分子状态。

03. 支撑空间蛋白质组学

• 对 34 例患者血栓中LMD 分离的中性粒细胞进行蛋白质组测序。

• 对比预后良好 / 不良组，筛选出显著上调的蛋白：SERPINB3。

• 证明 SERPINB3 是血栓中性粒细胞特异性高表达、并与血栓硬化、溶栓抵抗、预后差强相关的关键分子。

04. 方法学创新

• 建立 “三维成像 + 多重染色 + LMD 空间蛋白质组" 一体化血栓研究平台。在人缺血性卒中血栓中实现原位免疫细胞的空间分子图谱解析。

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