介绍徕卡荧光显微镜的灯泡调中和荧光观察

    一、灯泡调中：

    （1）任选一块标本放在载物台上；

    （2）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路，转动滤色片组转换手轮，将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路，并将10X荧光物镜转入光路；

    （3）调节粗微调手轮，将标本像调焦清晰；

    （4）前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆，使视场光栏成像清晰，转动视场光栏拨杆将视场光栏收小，调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中，然后再将视场光栏开至较大；

    （5）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路，前后调节灯箱上的聚光镜拨杆，使汞灯的弧光在视场内成像清晰；

    （6）调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使汞灯的弧光居中；

    （7）调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使光源的反射像与汞灯的弧光分开；

    （8）转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路，此时视场照明均匀。

 

    二、荧光观察：

    （1）将荧光染色标本放到载物台上。

    （2）将10X平场物镜或40X荧光物镜转入光路，调节载物台纵横移动手轮，将标本移入光路。

    （3）转动滤光片转换拨轮，将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。滤光片选择正确与否，是徕卡荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时，必须遵守斯托克斯定律：激发滤光片的透射波长<双色束分离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片，出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配，在观察和摄影时，只需选择滤光片组即可。

    （4）调节粗调手轮，当看清荧光图像轮廓后，再用微调手轮调焦，直至看到清晰的荧光图像。

    （5）当需要得到较强的荧光图像时，可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路，可获得较明亮的荧光图像。

    （6）当需要使用40X或100X荧光物镜观察时，应在标本和物镜间加上甘油，油中不能有影响观察的小泡或杂质。使用时可使甘油慢慢浸润一会儿，然后轻轻左右来回转动物镜转换器以排除气泡。

     徕卡荧光显微镜对于物质的检出能力是非常高的，具有放大的作用；而且对于被检测物质的细胞的刺激也是非常小的，可以检测活体的染色体；还有就是可以进行多个步骤的染色。对于荧光素的构造观察是非常好的，一般的显微镜是看不出来的。而且对于一些物质是否有荧光，荧光是什么色调的进行判断，还能看出是不是抗体的荧光。此款显微镜对于物体的定性、定量分析都是可以测定的。