激光共聚焦显微镜(LaserScanningConfocalMicroscope简称LSCM)是以激光作为激发光源,采用光源针孔与检测针孔共轭聚焦技术,对样本进行断层扫描,以获得高分辨率光学切片的荧光显微镜系统,并带有一套对其所观察到的对象进行数字图像分析处理的系统软件。
激光共聚焦显微镜(LSCM)属于细胞生物领域的新型仪器,在医学基础研究中应用于多重荧光影像、3D立体影像重建、3D动态影像获取与分析、神经立体分布影像、形态与动态分析、次微米单晶荧光影像技术、多重荧光蛋白影像技术、荧光共振能量转移、细胞离子流定量分析、长时间影像记录、Z轴扫描与测量、基因影像分析、染色体多重荧光原色表现、活体胚胎研究、穿透光影像/反射光影像、材料表面分析、材料显微硬度分析、晶园分析及薄膜分析。简而言之,只要目的结构是用荧光探针标记的,都可用激光共聚焦显微镜观察。
激光共聚焦显微镜在以下研究领域中应用较为广泛:
1、细胞生物学:如:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡机制;各种细胞器、结构性蛋白、DNA、RNA、酶和受体分子等细胞特异性结构的含量、组分及分布进行定量分析;DNA、RNA含量、利用特定的抗体对紫外线引起的DNA损伤进行观察和定量;分析正常细胞和癌细胞细胞骨架与核改变之间的关系;细胞黏附行为等
2、生物化学:如:酶、核酸、受体分析、荧光原位杂交、杂色体基因定位等,利用共聚焦技术可以取代传统的核酸印迹染交等技术,进行基因的表达检测,使基因的转录、翻译等检测变的更加简单、准确。
3、药理学:如:药物对细胞的作用及其动力学;药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量
4、生理学、发育生物学:如:膜受体、离子通道、离子含量、分布、动态;动物发育以及胚胎的形成,骨髓干细胞的分化行为;细胞膜电位的测量.荧光漂白恢复(FRAP)、荧光漂白丢失(FLIP)的测量等。
5、遗传学和组胚学:如:细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断。