徕卡激光共聚焦显微镜是近代生物医学图象仪器的重要发展之一,它是在成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针,利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,以及在亚细胞水平上观察生理信号及细胞形态的变化。主要用于组织切片、活细胞的荧光标记、三维图像重建分析研究;细胞生物物质、离子的定性、定量、定时和定位分布检测等,可以在同一张样品上同时进行多重荧光标记观察。对活细胞或组织切片进行连续扫描,可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。与普通荧光显微镜相比,具有更高对比度、解析度和高灵敏度。
在使用过程中如果使用和维护不当,常会出现一些问题,或者不能达到仪器的应有的效果。所有这些情况,有的是由于使用不当所致,有的是由于维护不善,长年失修引起的。因此对徕卡激光共聚焦显微镜的合理使用和妥善维护是非常重要的:
1、在使用时,要根据使用要求选用适当的放大倍数。
2、将各倍率的物镜浓顺序装在转换器上,在物镜安装前一定要将物镜的螺纹和接触端面以及转换器的螺孔和接触面部力构应清洁处理,不允许有任何灰尘存在,否则,会造成安装不对而影响光学系统和成象质量。
3、按所要观察的标本切片放置在工作台面上,并用压片将标本切片压紧,如有移动尺的显微a,可用卡脚将标本切片卡平稳,不然当移动只作纵向或横向移动时,观察的象团不稳定,当然这也有可6曙由于移动尺本身质量不好所致。如有象质不稳定时,则可作适量的微调即能弥补这个缺点。如果发现微调值太大时,这说明移动尺作纵向或横向移动的轨迹线不平行于工作台面,或可能是工作台面的不平皮。在这种情况下,应将显微镜送检修单位进行修理。
4、在观察标本切片时,必然要进行调焦,首先是祖调,而后是微调。在根调时应根据不同倍率物镜的工作距离作粗购的调节,接着用眼观察目镜作粗调,直至能看到标本的轮廓后再进行微调。
5、在观察标本切片时,需要有一定的照明,其照明的光源有自然光源和人工光源两种,不管用那种光源,为使在观察时能得到清晰的物象,共亮度要合
适。