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多重荧光标记101:基本术语表

发布时间:2023-01-19      点击次数:178

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用Cell DIVE成像的胰腺癌组织切片,显示30个生物标志物

揭秘精密系统


生物组织是多类细胞中数千种蛋白质相互作用的结果,这些蛋白质共同保障组织运行正常。多标免疫荧光成像是一种新型技术,清晰地可视化、识别、量化多种生物标志物及其在微环境中的分布情况,以便用户获取更清晰的目标组织图像(包括多类细胞及其环境)。


为便于您了解多标组织成像,我们整理了一些术语供您参考。


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图1:胰腺癌的多标组织成像分析整体解决方案显示六轮四种生物标志物。右侧为最终的多标组织成像,共显示了24个生物标志物。




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图2:用Cell DIVE成像的胰腺癌组织切片,显示4种生物标志物:SMAC、PCAD、ATP101和LDHA。

自发荧光

生物样本自然发射的光。自发荧光会干扰生物标志物成像,将其去除可以提高生物标志物的信噪(自发荧光)比。去除自发荧光后,分析时只需考虑真正的阳性生物标志物即可。




生物标志物

一种用于指示生物来源、特定器官的存在情况,或生理条件或过程;尤其可作为评判医疗状况(易感性)的诊断指标。




染料偶联抗体

附着有荧光分子的多克隆或单克隆抗体,可用于可视化组织。




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图3:30种生物标志物的表达模型。(左)生物标志物的细胞圈选。(右)30种生物标志物的Cell DIVE图像。

福尔马林固定的

石蜡包埋(FFPE)组织切片

FFPE是一种保存和制备活检标本的方式。将组织样本固定在甲醛中,以保存好组织内的蛋白质与结构。固定后,将组织嵌入石蜡,以便对组织切片并将其放上玻片。




免疫荧光(IF)

一种依靠抗体与其抗原相互作用的染色技术。附着荧光标记物(荧光基团)的染料偶联抗体与其在细胞内的特异性生物分子靶点相结合,以可视化靶分子及其在样本中的分布情况。

  • 接免疫荧光——使用可直接结合特定靶点的单一抗体。荧光基团专门与抗体偶联。

  • 接免疫荧光——使用两种抗体。一抗与特定靶点结合。然后,荧光基团偶联的二抗与一抗结合,可用于检测。




超多标免疫荧光成像

一种免疫荧光技术,用于可视化组织微环境中多种抗原的分布情况。使用荧光基团标记的抗体探测FFPE组织切片,然后成像,即可去除荧光信号。接下来,再用另外的抗体重新探测组织。单个图像被分层,生成组织的完整图像和所有已探测抗原的定位。




多标表型谱

每种细胞类型均表达有利于其功能的特定蛋白质。这些单独的生物标志物全部可视化后,有助于鉴定组织微环境中的细胞,从而构建整个组织表型的完整图像。




单细胞分析

在单细胞层上研究特定生物分子的存在和定位情况。单细胞分析可用于研究群体内的细胞间变异情况(如器官或组织内)。




空间细胞生物学/

空间生物标志物分析

研究组织环境中的细胞。空间细胞生物学和生物标志物分析可用于绘制组织内细胞及其与周围细胞的相互作用的图像。




组织/肿瘤微环境

组织结构中各种细胞类型有组织的组合,通过物理、机械和生化机制影响细胞表型。全面了解肿瘤微环境有利于评估癌症进展情况,找出治疗癌症的新疗法。




宽场显微镜

常用于多标显微镜技术,可将整个目标标本暴露在光源之下,从而对整个视场进行成像。在多标宽场显微镜中,建议使用薄标本(单个细胞的厚度)进行细胞表型分析。




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目前,癌症研究人员可用的组织成像分析系统并不多,而Cell DIVE则是一款高精度、开放式的解决方案,能指导您如何设计和执行超多标研究。


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  • 挑选适合您当前研究的自动化方案,并根据研究需求随时进行调整

  • 您可以自行控制抗体组合的构建方式:选择抗体类型和数量,并为您的研究量身定制组合

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