病理检查中,把组织制成薄切片、染色后放在显微镜下观察,是判断组织形态和病变情况的基本方法。正置显微镜物镜朝下、载物台在下方,适合观察放在载玻片上的切片,是病理实验室的常用设备。徕卡正置显微镜在组织切片观察中使用较多。本文面向初学者,介绍这类显微镜的使用入门与维护。 一、认识部件
正置显微镜主要由光源、载物台、物镜、目镜、调焦机构和聚光镜组成。物镜装在物镜转换器上,可以切换不同倍率;载物台用于放置载玻片,可以通过移动旋钮平移切片;粗、细调焦旋钮用于上下移动载物台或者镜筒。
二、观察前的准备
打开光源,调节亮度到舒适的程度,避免太亮刺眼。把染色并封片好的载玻片放到载物台上,盖玻片朝上,用片夹固定。先用低倍物镜,调整到能看清切片轮廓的位置。
三、观察步骤
先低倍找目标,再逐步切到高倍观察细节。调焦时先用粗调,接近焦面后改用细调,动作要轻。需要在不同区域观察时,用载物台移动旋钮平移切片。换高倍物镜前,注意物镜与切片之间的距离,避免镜头顶到盖玻片。
四、成像与拍照
需要记录图像时,可以用配套的相机和软件拍摄。拍照前调整好亮度和聚焦,保持切片水平。拍摄的图像要做好标注,记录病例编号、放大倍数和观察部位,便于归档和讨论。图像亮度和色彩的调整应保持合理,避免过度处理影响判断。
五、使用注意事项
载玻片和盖玻片要干净、封片牢固,避免液体污染镜头。使用油镜时按规范滴加镜油,用完后及时用镜头纸擦去,不能让油干在镜头上。多人共用显微镜时,用完后把物镜转到低倍、亮度调低、盖上防尘罩。
六、日常维护
显微镜应放在干燥、清洁、少尘的房间,避免阳光直射。定期擦拭镜头和目镜,清洁载物台。机械传动部位保持顺滑,发现调焦不灵、切换卡顿时及时报修。若环境湿度大,可在存放柜内放置干燥剂。对初学者来说,规范的操作习惯比追求高倍率更重要,先把低倍观察做熟,再逐步掌握高倍和拍照,日积月累就能借助显微镜看清组织切片的细节。
遇到不熟悉的染色方法,可以先查阅相关规范,弄清楚观察重点,再看片。